小鼠线粒体 DNA 损伤定量 qPCR 检测试剂盒

线粒体 DNA（mtDNA）是一种存在于线粒体内的环状 DNA，在细胞能量产生过程中发挥关键作用。mtDNA 的损伤会干扰细胞能量代谢过程，导致细胞生长下降及细胞凋亡。mtDNA 损伤可作为评估药物及环境毒素遗传毒性的有效生物标志物。ScienCell 的小鼠线粒体 DNA 损伤定量 qPCR 检测试剂盒（MMDQ）基于以下原理：各种 DNA 损伤会阻碍 DNA 聚合酶的延伸过程。因此，在相同条件下，损伤较少的 DNA 比受损 DNA 更容易扩增。损伤水平可通过损伤的泊松分布，以每千碱基对（kb）中的损伤数进行定量，或通过比较目标样本与对照样本中完整 mtDNA 的百分比进行分析。此外，本检测试剂盒还可通过在移除 DNA 损伤因子后，监测目标 DNA 扩增恢复情况，从而追踪 DNA 修复动力学。本检测方法可直接从总细胞 DNA 中监测 mtDNA 的完整性，无需分离线粒体 DNA。 

本试剂盒中的引物组（货号 #M8978a 和 #M8978b）可识别并扩增小鼠 mtDNA 中最保守区域的序列，同时避免扩增核基因组 DNA 中的非目标序列。我们使用 2X LanaRana Long Range PCR Master Mix（货号 #MB6098）和 Mouse Long mtDNA Primer Set（货号 #M8978a）扩增 8.7 kb 的长片段 DNA。对于 57 bp 的短 mtDNA 片段扩增，则使用 2X GoldNStart TaqGreen qPCR Master Mix（货号 #MB6018a-1）和 Mouse Short mtDNA Primer Set（货号 #M8978b）。来自未受损（未处理）细胞及受损（经 200 µM H2O2 处理）细胞的小鼠 DNA 分别作为反应的阳性和阴性对照。