AP-1双报告载体

AP-1 信号通路（Activator Protein 1）通过 MAPK（丝裂原活化蛋白激酶）级联反应（JNK - Jun N 端激酶、ERK - 细胞外信号调节激酶、p38）整合多种细胞外信号，从而激活 Jun/Fos 家族转录因子，这些转录因子结合 AP-1 响应元件（TRE），调控参与细胞增殖、分化、凋亡和炎症的基因，其失调与癌症和纤维化相关。PMA（Phorbol 12-myristate 13-acetate）或生长因子可通过 PKC/Ras/MAPK（蛋白激酶 C/Rat Sarcoma virus/丝裂原活化蛋白激酶）通路及下游 c-Fos/c-Jun 二聚化激活 AP-1 [1-2]。AP-1 双报告载体（AP1RV）是一种基于 DNA 的双荧光素酶系统，旨在监测哺乳动物细胞中依赖 AP-1 的转录活性。该系统包括 AP-1 Reporter Mix，其中 Firefly luciferase 由多聚化的 AP-1 响应元件驱动，并与组成型表达的 Renilla luciferase 质粒共同配制用于内部标准化，以及 Negative Control Reporter Mix（不含 AP-1 结合位点），用于定义不可诱导的背景信号和通路特异性。Firefly luciferase 提供与 AP-1 驱动转录成比例的 ATP 依赖性强信号，而 Renilla luciferase 作为 ATP 非依赖性的内部对照，使 AP-1 通路活性能够被准确量化，适用于通路研究、基因扰动实验以及小分子或生物调节剂的筛选。